BIM試劑盒報道:
或許大家已認(rèn)同在裸鼠體內(nèi)建立人類腫瘤和轉(zhuǎn)移模型,但不可否認(rèn)該模型花費(fèi)太高,周期太長,實驗重復(fù)性和一致性較差。實際上模式生物斑馬魚同樣可作為腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的理想模型,不僅可以減少金錢和時間上的投入,還可以從生物整體水平上觀察到腫瘤腺細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移的動態(tài)變化過程。要想在斑馬魚體內(nèi)建立好這個模型,除了具備熟練的顯微操作等技術(shù)外,還不可小覷以下幾個小提醒:
1. 注射50-300個人類腫瘤細(xì)胞到胚胎發(fā)育48小時的斑馬魚體內(nèi),細(xì)胞過少,無法建立腫瘤模型,細(xì)胞過多導(dǎo)致斑馬魚發(fā)育畸形和致死;
2. 腫瘤細(xì)胞應(yīng)注射在斑馬魚的periviline cavity(如下圖所示),如注射到其他部位往往導(dǎo)致細(xì)胞無法進(jìn)入斑馬魚血液循環(huán)體系,失去生長和遷移的微環(huán)境;
3. 用CM-DiI來標(biāo)記腫瘤細(xì)胞,因為這種染料可以同時標(biāo)記母細(xì)胞和分裂生長的子細(xì)胞,而且染色作用可持續(xù)2周以上;
4. 已經(jīng)注射腫瘤細(xì)胞的斑馬魚先在28℃的培養(yǎng)箱內(nèi)孵化約1小時,然后轉(zhuǎn)移到35℃的培養(yǎng)箱內(nèi),這個溫度有助于斑馬魚和人類腫瘤細(xì)胞共生長。