上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒擁有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏度高等幾大特點(diǎn)。ELISA實(shí)驗(yàn)條件主要由實(shí)驗(yàn)室的操作環(huán)境和操作人員的操作熟練程度兩方面組成,但試劑盒對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作環(huán)境的要求是幾種藥物殘留檢測(cè)方法中相對(duì)較低的。由于大部分的試驗(yàn)操作步驟都是由實(shí)驗(yàn)人員來(lái)完成的,人為的誤差相對(duì)嚴(yán)重一些。今天上海恒遠(yuǎn)小編就來(lái)分享(技術(shù)篇)使用快速簡(jiǎn)便的ELISA試劑盒需注意哪些問(wèn)題及解決辦法:
問(wèn):加入稀釋劑是否會(huì)將樣本進(jìn)一步稀釋?zhuān)?/strong>
答:因?yàn)橄♂寗┦羌尤氲剿械目字?,?biāo)準(zhǔn)和被測(cè)樣本都被同樣稀釋?zhuān)詷颖镜臐舛瓤蓮臉?biāo)準(zhǔn)曲線讀出,而不需作稀釋調(diào)整。
問(wèn):為什么不將測(cè)試范圍延伸到所述的靈敏度?
答:靈敏度是統(tǒng)計(jì)中大于零的可測(cè)到的zui低值。它是通過(guò)本底信號(hào)和試驗(yàn)的可變性計(jì)算出來(lái)的。靈敏度是將20個(gè)零復(fù)制物的中值加兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差從標(biāo)準(zhǔn)曲線換算成分析物的濃度。而zui低標(biāo)準(zhǔn)是我們可以放心的、仍可與標(biāo)準(zhǔn)曲線成直線相關(guān)的zui低點(diǎn),因而是可定量的。
問(wèn):標(biāo)準(zhǔn)曲線為什么要采用4-pl擬合?
答:R&D在研發(fā)和質(zhì)控我們絕大多數(shù)的quantikine ELISA試劑盒時(shí),采用4-相參數(shù)的曲線擬合。一般來(lái)說(shuō),它比log-log和直線有更好的曲線擬合。如果數(shù)據(jù)分析不可用4-pl的話,log-log是下一個(gè)的選擇。
問(wèn):試驗(yàn)步驟中說(shuō)要用500rpm,我的搖床達(dá)不到。這個(gè)速度是正確的嗎?
答:500rpm使用的是0.12英寸的震蕩軌道。如果你的震蕩器用更大的震蕩軌道,500rpm的確是過(guò)快了。在這種情況下,你應(yīng)根據(jù)R&D Systems的建議重新調(diào)整震蕩速度。你可拿一個(gè)多余的96孔微孔板,加入洗液,洗液的量與實(shí)驗(yàn)時(shí)孔中的溶液量一致;封板后,調(diào)整震蕩器的速度,直到液體在孔的上部劇烈旋轉(zhuǎn)但不濺到封膜上或產(chǎn)生泡沫為止。
問(wèn):quantikine ELISA試劑為什么需要做稀釋?zhuān)?/strong>
答:① 在絕大多數(shù)的樣本中細(xì)胞因子的含量非常高,如不經(jīng)稀釋?zhuān)x數(shù)將高于標(biāo)準(zhǔn)曲線;②也是zui普遍的原因我們建議做稀釋?zhuān)菍颖局械母蓴_或基質(zhì)效應(yīng)稀釋掉。
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