ELISA實(shí)驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,但是真正到自己上手的時(shí)候還是會(huì)犯糊涂,出狀況!如何更好地運(yùn)用ELISA試劑盒、掌握ELISA實(shí)驗(yàn)?zāi)??上海恒遠(yuǎn)技術(shù)為您講解:如何靈活運(yùn)用ELISA試劑盒?
1.對(duì)于一些小分子的檢測(cè),一般來(lái)說(shuō),要用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA去檢測(cè),也要購(gòu)買(mǎi)采用這個(gè)方法的盒子。一般細(xì)胞因子的檢測(cè),都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測(cè),因?yàn)橐蜃臃肿恿勘容^大,一般10幾個(gè)KD左右,很容易找到兩個(gè)或者多個(gè)抗原表位。
而小分子很難找到兩個(gè)不同的表位,也就決定了包被抗體和檢測(cè)抗體無(wú)法同時(shí)結(jié)合小分子并固相化。解決方案就是酶標(biāo)板上包被二抗,每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶標(biāo)記的檢測(cè)抗體,顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
2.還有一個(gè)問(wèn)題,這是不是客戶的誤區(qū),就是拿來(lái)一個(gè)指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測(cè)。ELISA檢測(cè)方法簡(jiǎn)單,靈敏度高,但是該檢測(cè)活性的檢測(cè)活性,該做western的做western。
上海恒遠(yuǎn)生物對(duì)ELISA的操作提醒:
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
4.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
5.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
要想熟練的靈活運(yùn)用ELISA試劑盒,還需要多動(dòng)手操作。在實(shí)驗(yàn)中遇到相關(guān)技術(shù)問(wèn)題,都可我司技術(shù)人員,上海恒遠(yuǎn)生物為您解答!