又到了ELISA專題一刻,今天要為大家介紹的是白細(xì)胞介素試劑盒研究報(bào)告內(nèi)容。根據(jù)我公司技術(shù)專員介紹,ELISA步驟的順序是:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋→加樣→溫育→配液→洗滌→加酶→溫育→洗滌→顯色→終止→測(cè)定。
zui后的測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,那么我們要怎樣分析判斷ELISA結(jié)果呢?這里需要重點(diǎn)說(shuō)明四點(diǎn):
1.儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IFN-Y標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IFN-Y含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
3.檢測(cè)值范圍:0-400pg/ml
4.敏感度:1.0pg/ml
在整個(gè)白介素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,上海恒遠(yuǎn)技術(shù)專員還特別說(shuō)明注:ELISA試劑盒以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月,-80℃不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月;標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
·實(shí)驗(yàn)過(guò)程注意事項(xiàng):
1.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.上海恒遠(yuǎn)提供中英雙語(yǔ)說(shuō)明書,如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
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2014.10.14