多肽純度的定義
多肽的純度通常是通過HPLC,用每分鐘1%的標(biāo)準(zhǔn)乙腈梯度來檢測決定的。合成過程中,氨基酸之間的交聯(lián)效率不是總能達(dá)到100%,因而產(chǎn)生一系列的氨基酸缺失的雜質(zhì)。大多數(shù)這樣的氨基酸缺失的雜質(zhì)在純化過程中都被去掉了,但有少數(shù)的雜質(zhì)其色譜表現(xiàn)與目標(biāo)多肽很相近。這些氨基酸缺失的雜質(zhì)肽留在了多肽樣品中就構(gòu)成了余下的幾個百分點。
多肽的凈含量
干品多肽的重量中不僅僅包含多肽,還包含有一些非肽的組份,如水,被吸收的溶劑、配位離子和鹽等。肽的凈含量是指肽在其中的重量百分比,這個百分比的數(shù)值范圍很大,可能從50%到90%,取決于純度、序列以及合成和純化的方法,不要將肽的凈含量和肽的純度混為一談,它們是*不同的兩個概念。純度通常是由HPLC決定的。純度定義的是多肽樣品中含正確序列的組分的百分比,而肽的凈含量是指樣品中肽類物質(zhì)相對于總物質(zhì)所占的百分比,肽的凈含量通常是用氨基酸組分分析或紫外分光法測定的。這個信息主要是在一些對肽的濃度很敏感的實驗中,對計算肽的濃度是很重要的。
MAP的應(yīng)用 ELISA試劑盒價格
MAP是復(fù)合抗原多肽,是將線型多肽的C端連接在多聚Lys核心上形成的分枝多肽,從而增大了整個分子的大小。雖然MAP減少了多肽與KLH交聯(lián)的步驟,然而由于MAP多肽的構(gòu)象活動空間有限,通過它產(chǎn)生的抗體與通過KLH交聯(lián)法產(chǎn)生的抗體相比常常不能被蛋白識別。再者,做MAP時沒有自由的肽產(chǎn)生,因而很難除去對多聚Lys核心部分產(chǎn)生的抗體。HPLC純化MAP很困難。而且由于MAP分子的不均一性和很大的分子大小,也不能提供質(zhì)譜鑒定。