淺析乙肝血清學(xué)檢驗中的三種不常見現(xiàn)象
劉 云
(南京建鄴醫(yī)院 江蘇 南京 210017)
【摘要】 目的:通過臨床收集分析乙肝血清學(xué)檢驗中的三種不常見現(xiàn)象,探討其影響因素是否與檢測試劑有關(guān),分析產(chǎn)生此類現(xiàn)象的根本原因。方法:收集2009年5月-2012年4月本院的乙肝血清學(xué)檢驗樣本,同一個樣本用兩種不同公司的ELISA試劑檢測,根據(jù)檢測結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析;根據(jù)檢測結(jié)果,統(tǒng)計不常見現(xiàn)象的發(fā)生率。結(jié)果:同一個樣本用兩種不同公司的ELISA試劑檢測,根據(jù)檢測結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析,P>0.05,沒有統(tǒng)計學(xué)差異。1500例血清樣本中,發(fā)生不常見現(xiàn)象者占2%,共30例。結(jié)論:ELISA試劑對檢測結(jié)果不構(gòu)成影響,即乙肝血清學(xué)檢驗不常見現(xiàn)象與試劑無關(guān);不常見現(xiàn)象多發(fā)生于感染乙肝病毒亞型的患者,臨床應(yīng)在乙肝血清學(xué)檢驗的基礎(chǔ)上多做分析,以輔助診斷和治療。
【關(guān)鍵詞】 乙肝血清學(xué) 不常見 ELISA 乙肝病毒亞型
【中圖分類號】R446.6 【文獻標(biāo)識碼】B 【文章編號】1672-2523(2012)12-03 76-01
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是我國病毒性肝炎患者的主要病因之一,臨床上常用血清學(xué)檢測HBV標(biāo)志物來觀察HBV感染情況。HBV標(biāo)志物包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,該標(biāo)志物檢測俗稱乙肝兩對半試驗[1]。人體感染HBV后,血清中抗原、抗體的變化有一 定的規(guī)律,有一部分現(xiàn)象是常見的,如HBsAg、HBeAb、HBcAb均呈陽性, 俗稱“大三陽”;不常見現(xiàn)象是相對于這些常見現(xiàn)象而言的。筆者根據(jù)本次 臨床研究,主要介紹三種不常見現(xiàn)象,具體匯報如下:
1資料與方法
1.1血清樣本
選擇2009年5月至2012年4月于我院檢驗科檢測乙肝兩對半試驗的血 清樣本1500例,其中,男性836例,女性664例;年齡在10-70歲之間,平均年 齡(34.22±10.26)歲。經(jīng)統(tǒng)計,患者的年齡、性別對乙肝血清學(xué)檢測的常見或者不常見現(xiàn)象無統(tǒng)計學(xué)意義,基線資料一致。
1.2檢測試劑
ELISA試劑盒由上海麗臣生物科技有限公司和上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司生產(chǎn),選擇兩種公司同一批號的ELISA試劑盒,以避免試劑造成的偏差。
1.3相關(guān)儀器
ELX800酶標(biāo)儀(BIO-TEK INSTRUMENTS.INC.),LXJ-ⅡB離
心機(上海安亭科學(xué)儀器廠)。
1.4方法
1.4.1收集上清液 空腹取上述來我院檢驗科檢測乙肝兩對半患者的靜脈血3-5ml于采血管中,將采好血的采血管置于離心機中,以3000 轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速離心10min。接著輕輕取出已離心好的采血管,防止過大的動作 造成振蕩而使上清液渾濁而廢用,去蓋,用1000ul的移液器吸取上清到1. 5mlEP管中,在EP管上做好相應(yīng)標(biāo)記,如患者姓名及日期等,放于-80℃冰 箱,保存待用。
1.4.2ELISA檢測 將收集好的上清液置于同一個實驗室的相同條件下,每一個相同的樣本分別使用上海麗臣生物科技有限公司生產(chǎn)的ELISA 試劑盒(下稱L組)和上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司生產(chǎn)的ELISA試劑盒(下 稱H組),嚴(yán)格按照各試劑公司的說明書進行操作,并在酶標(biāo)儀上讀取相關(guān) 數(shù)據(jù),保存以便分析。
1.5統(tǒng)計學(xué)分析
對所有研究數(shù)據(jù)均采用SPSS18.0軟件進行處理。計量資料的描述以
(±S)表示,計數(shù)資料用x2檢驗,配對t檢驗,當(dāng)P≤0.05認(rèn)為兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義;P>0.05認(rèn)為兩者差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1L組和H組比較
2組配對t檢驗結(jié)果顯示,同一個樣本,在L組和H組的ELISA檢測得出的結(jié)果相同,無統(tǒng)計學(xué)意義P>0.05,說明不同試劑對乙肝血清學(xué)檢驗的變異現(xiàn)象無影響。
2.2不常見現(xiàn)象
在我院所選的1500例樣本中,筆者所研究的三種乙肝血清學(xué)檢驗不常見現(xiàn)象占2%,共30例,具體見表1。
3討論
乙型肝炎病毒是指由嗜肝的HBV引起的,以肝小葉炎癥和壞死為主 要病理改變的傳染病。HBV血清學(xué)分型為gyw-10、gyw-8、gyw-2、golw 及gdw-17等,而感染HBV的同時或者其后感染了亞型,會影響乙肝血清學(xué) 檢驗的結(jié)果,而出現(xiàn)不常見的現(xiàn)象[2]。通過本研究實驗結(jié)果可見,不常見現(xiàn)象與ELISA試劑無關(guān)。本臨床研究出現(xiàn)的不常見現(xiàn)象一:HBsAg與HBsAb并存[3],其原因為感染HBV后,在形成充分免疫效應(yīng)的同時又感染了另類亞型;或者初期感染HBV產(chǎn)生抗體,但對其他亞型不具備防御作用,其后再感 染亞型,造成重疊感染;或者注射乙型肝炎疫苗產(chǎn)生抗體再感染亞型,提示不同亞型的復(fù)數(shù)感染,一愈一存的現(xiàn)象。不常見現(xiàn)象二:HBsAb與HBeAg并存[3],HBsAb常與HBsAg形成HBsAg/IM,因此,可以為HBsAg消失,而
HbsAb為陽性,多為非典型急性H BV肝炎感染中期。不常見現(xiàn)象三: HbsAb、HBsAg與HBcAb并存[3],感染HBV后HBcAb出現(xiàn)早,它不是保護性抗體,而是感染標(biāo)志,當(dāng)這三者并存時,若肝功能異常,則提示感染了HBV亞型。
綜上所述,在依賴實驗室手段檢測出乙肝血清學(xué)不常見現(xiàn)象時,除了 進一步分析患者是否感染HBV亞型,還應(yīng)當(dāng)詳細(xì)詢問患者的病史,以幫助 了解有無亞型感染,為乙型肝炎的診治提供更加完善的證據(jù)。
參考文獻
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[3]汪承柏.中西醫(yī)結(jié)合診治重度黃疸肝病[M].北京市:人民軍醫(yī)出版社, 2011:9-18.