Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。如果選對了試劑盒,用對了實(shí)驗(yàn)技巧,就會讓您的實(shí)驗(yàn)效率事半功倍。
那么如何選購一款*,價(jià)格實(shí)惠的 ELISA Kit 呢?
大家都知道市面上任意品牌的一個(gè) ELISA Kit 售價(jià)都不便宜,如果選錯(cuò)了試劑盒,輕則損失一筆科研經(jīng)費(fèi), 重則毀掉整個(gè)實(shí)驗(yàn)課題.
如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要,有以下幾點(diǎn)可供參考。
1. 查找待測樣本的蛋白濃度:可通過 NCBI 的文獻(xiàn),uniprot,pax-dab 上給出的蛋白表達(dá)量參考值來比較 ELISA 試劑盒中給出的樣本值與報(bào)道值是否一致。
2. 試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類:除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有:血清和血漿,細(xì)胞上清,和細(xì)胞裂解液。
3. 試劑盒的檢測范圍:也就是標(biāo)曲范圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi),對于濃度很高的樣本,可以先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。
4. 試劑盒中的稀釋線性及回收率:
a. 稀釋線性一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來,看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的best佳稀釋倍數(shù);
b. 稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的情況,加標(biāo)稀釋線性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測定是否準(zhǔn)確;同樣也是確定待測樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線性和回收率的范圍在 80%-120% 比較合適;
5. 試劑盒的其它指標(biāo):
①特異性
ELISA 試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分,抗體對有關(guān)。若抗體對中之一為多抗,另一個(gè)必須為單抗,建議使用雙單抗。
②靈敏度
靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標(biāo)量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的 ELISA 試劑盒。
③重復(fù)性
科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性,一般 ELISA 試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 15% 以內(nèi)。
④簡便性
試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下,實(shí)驗(yàn)時(shí)間越短,操作越便利,越容易受到用戶歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個(gè)指標(biāo)。
⑤經(jīng)濟(jì)性
可以選擇價(jià)格適中,排名度靠前,口碑好的,一個(gè)品牌不光要有度,更重要的是美譽(yù)度。通過行業(yè)調(diào)查公司以及網(wǎng)絡(luò),相關(guān)宣傳資料等可以找到美譽(yù)度高的 ELISA 試劑盒供應(yīng)商,這個(gè)反映的不僅是產(chǎn)品質(zhì)量的問題,對供應(yīng)商的售前售后服務(wù)也是一個(gè)非常嚴(yán)格的檢驗(yàn)。